<?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?>
<!DOCTYPE root>
<article xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink" xmlns:xsi="http://www.w3.org/2001/XMLSchema-instance" xmlns:ali="http://www.niso.org/schemas/ali/1.0/" article-type="other" dtd-version="1.2" xml:lang="en"><front><journal-meta><journal-id journal-id-type="publisher-id">Almanac of Clinical Medicine</journal-id><journal-title-group><journal-title xml:lang="en">Almanac of Clinical Medicine</journal-title><trans-title-group xml:lang="ru"><trans-title>Альманах клинической медицины</trans-title></trans-title-group></journal-title-group><issn publication-format="print">2072-0505</issn><issn publication-format="electronic">2587-9294</issn><publisher><publisher-name xml:lang="en">Moscow Regional Research and Clinical Institute (MONIKI)</publisher-name></publisher></journal-meta><article-meta><article-id pub-id-type="publisher-id">342</article-id><article-id pub-id-type="doi">10.18786/2072-0505-2016-44-2-234-241</article-id><article-categories><subj-group subj-group-type="toc-heading" xml:lang="en"><subject>ARTICLES</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="toc-heading" xml:lang="ru"><subject>ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="article-type"><subject></subject></subj-group></article-categories><title-group><article-title xml:lang="en">THE NANOSTRUCTURE OF ERYTHROCYTE MEMBRANES UNDER BLOOD INTOXICATION: AN ATOMIC FORCE MICROSCOPY STUDY</article-title><trans-title-group xml:lang="ru"><trans-title>НАНОСТРУКТУРА МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ИНТОКСИКАЦИИ КРОВИ. ИССЛЕДОВАНИЕ С ПОМОЩЬЮ АТОМНОЙ СИЛОВОЙ МИКРОСКОПИИ</trans-title></trans-title-group></title-group><contrib-group><contrib contrib-type="author"><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Sergunova</surname><given-names>V. A.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Сергунова</surname><given-names>В. А.</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>PhD (in Biology), Senior Research Fellow, Laboratory of Biophysics of Cells Membranes in Critical States</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>канд. биол. наук, ст. науч. сотр., лаборатория биофизики мембран клеток при критических состояниях</p></bio><email>orbf@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/><xref ref-type="aff" rid="aff2"/></contrib><contrib contrib-type="author"><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Chernyaev</surname><given-names>A. P.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Черняев</surname><given-names>А. П.</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>PhD (in Physics and Mathematics), Professor, Head of the Chair of Physics of Accelerators and Radiation Medicine, Faculty of Physics</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>д-р физ.-мат. наук, профессор, заведующий кафедрой физики ускорителей и радиационной медицины физического факультета</p></bio><email>orbf@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff3"/><xref ref-type="aff" rid="aff4"/></contrib><contrib contrib-type="author"><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Kozlov</surname><given-names>A. P.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Козлов</surname><given-names>А. П.</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>PhD (in Physics and Mathematics), Associate Professor, Chair of Medical and Biological Physics</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>канд. физ.-мат. наук, доцент кафедры медицинской и биологической физики</p></bio><email>orbf@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff5"/><xref ref-type="aff" rid="aff6"/></contrib><contrib contrib-type="author"><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Bliznyuk</surname><given-names>U. A.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Близнюк</surname><given-names>У. А.</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>PhD (in Physics and Mathematics), Senior Lecturer, Chair of Physics of Accelerators and Radiation Medicine, Faculty of Physics</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>канд. физ.-мат. наук, ст. преподаватель кафедры физики ускорителей и радиационной медицины физического факультета</p></bio><email>orbf@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff3"/><xref ref-type="aff" rid="aff4"/></contrib><contrib contrib-type="author"><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Borshchegovskaya</surname><given-names>P. Yu.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Борщеговская</surname><given-names>П. Ю.</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>PhD (in Physics and Mathematics), Lecturer, Chair of Physics of Accelerators and Radiation Medicine, Faculty of Physics</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>канд. физ.-мат. наук, преподаватель кафедры физики ускорителей и радиационной медицины физического факультета</p></bio><email>orbf@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff3"/><xref ref-type="aff" rid="aff4"/></contrib><contrib contrib-type="author"><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Kozlova</surname><given-names>E. K.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Козлова</surname><given-names>Е. К.</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>PhD (in Physics and Mathematics), Leading Research Fellow, Laboratory of Biophysics of Cells Membranes in Critical States1 ; Professor, Chair of Physics of Accelerators and Radiation Medicine, Faculty of Physics2 ;Professor, Chair of Medical and Biological Physics3</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>д-р физ.- мат. наук, вед. науч. сотр., лаборато- рия биофизики мембран клеток при критических состояниях1 ; профессор кафедры физики ускорителей и ра- диационной медицины физического факультета2 ; профессор кафедры меди- цинской и биологической физики3</p></bio><email>orbf@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/><xref ref-type="aff" rid="aff7"/><xref ref-type="aff" rid="aff8"/><xref ref-type="aff" rid="aff6"/></contrib><contrib contrib-type="author"><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Chernysh</surname><given-names>A. M.</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Черныш</surname><given-names>А. М.</given-names></name></name-alternatives><address><country country="RU">Russian Federation</country></address><bio xml:lang="en"><p>PhD (in Biology), Head of Laboratory of Biophysics of Cells Membranes in Critical States1 ; Professor, Chair of Medical and Biological Physics</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>д-р биол. наук, заведующий лабораторией биофизики мембран клеток при критических состояниях1 ; профессор кафедры медицинской и биологической физики</p></bio><email>orbf@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/><xref ref-type="aff" rid="aff9"/><xref ref-type="aff" rid="aff6"/></contrib></contrib-group><aff-alternatives id="aff1"><aff><institution xml:lang="en">V.A. Negovsky Scientific Research Institute of General Reanimatology</institution></aff><aff><institution xml:lang="ru">ФГБНУ «Научно-исследовательский институт общей реаниматологии имени В.А. Неговского»</institution></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff2"><aff><institution xml:lang="en">25/2 Petrovka ul., Moscow, 107031, Russian Federation</institution></aff><aff><institution xml:lang="ru">107031, г. Москва, ул. Петровка, 25/2, Российская Федерация</institution></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff3"><aff><institution xml:lang="en">Lomonosov Moscow State University</institution></aff><aff><institution xml:lang="ru">ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова»</institution></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff4"><aff><institution xml:lang="en">1 Leninskie gory, Moscow, 119991, Russian Federation</institution></aff><aff><institution xml:lang="ru">119991, г. Москва, Ленинские горы, 1, Российская Федерация</institution></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff5"><aff><institution xml:lang="en">I.M. Sechenov First Moscow State Medical University</institution></aff><aff><institution xml:lang="ru">ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России</institution></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff6"><aff><institution xml:lang="en">8/2 Trubetskaya ul., Moscow, 119991, Russian Federation</institution></aff><aff><institution xml:lang="ru">119991, г. Москва, ул. Трубецкая, 8/2, Российская Федерация</institution></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff7"><aff><institution xml:lang="en">25/2 Petrovka ul., Moscow, 107031, Russian Federation&#13;
Lomonosov Moscow State University</institution></aff><aff><institution xml:lang="ru">107031, г. Москва, ул. Петровка, 25/2, Российская Федерация&#13;
ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова»</institution></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff8"><aff><institution xml:lang="en">1 Leninskie gory, Moscow, 119991, Russian Federation&#13;
I.M. Sechenov First Moscow State Medical University</institution></aff><aff><institution xml:lang="ru">119991, г. Москва, Ленинские горы, 1, Российская Федерация&#13;
ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России</institution></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff9"><aff><institution xml:lang="en">25/2 Petrovka ul., Moscow, 107031, Russian Federation&#13;
I.M. Sechenov First Moscow State Medical University</institution></aff><aff><institution xml:lang="ru">107031, г. Москва, ул. Петровка, 25/2, Российская Федерация&#13;
ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России</institution></aff></aff-alternatives><pub-date date-type="pub" iso-8601-date="2016-03-15" publication-format="electronic"><day>15</day><month>03</month><year>2016</year></pub-date><volume>44</volume><issue>2</issue><issue-title xml:lang="en"/><issue-title xml:lang="ru"/><fpage>234</fpage><lpage>241</lpage><history><date date-type="received" iso-8601-date="2016-06-27"><day>27</day><month>06</month><year>2016</year></date><date date-type="accepted" iso-8601-date="2016-06-27"><day>27</day><month>06</month><year>2016</year></date></history><permissions><copyright-statement xml:lang="en">Copyright ©; 2016, Sergunova V.A., Chernyaev A.P., Kozlov A.P., Bliznyuk U.A., Borshchegovskaya P.Y., Kozlova E.K., Chernysh A.M.</copyright-statement><copyright-statement xml:lang="ru">Copyright ©; 2016, Сергунова В.А., Черняев А.П., Козлов А.П., Близнюк У.А., Борщеговская П.Ю., Козлова Е.К., Черныш А.М.</copyright-statement><copyright-year>2016</copyright-year><copyright-holder xml:lang="en">Sergunova V.A., Chernyaev A.P., Kozlov A.P., Bliznyuk U.A., Borshchegovskaya P.Y., Kozlova E.K., Chernysh A.M.</copyright-holder><copyright-holder xml:lang="ru">Сергунова В.А., Черняев А.П., Козлов А.П., Близнюк У.А., Борщеговская П.Ю., Козлова Е.К., Черныш А.М.</copyright-holder><ali:free_to_read xmlns:ali="http://www.niso.org/schemas/ali/1.0/"/><license><ali:license_ref xmlns:ali="http://www.niso.org/schemas/ali/1.0/">https://creativecommons.org/licenses/by/4.0</ali:license_ref></license></permissions><self-uri xlink:href="https://almclinmed.ru/jour/article/view/342">https://almclinmed.ru/jour/article/view/342</self-uri><abstract xml:lang="en"><p>Background: The effects of toxins on nanostructure of blood cells are one of the key problems of biophysics and medicine. Erythrocyte morphology and membrane structure are recognized as the main parameters of blood quality. Therefore, analysis of membrane defects under toxin effects seems an urgent issue. Aim: To identify characteristic features and patterns of changes in membrane nanostructure under hemin intoxication and during extended storage of erythrocyte suspension. Materials and methods: The study was done in vitro in human whole blood with addition of hemin, аnd in erythrocyte suspension with a CPD blood preservative stored at 4 °С for 30 days. The nanostructure of erythrocyte membrane was assessed by atomic force microscopy. Results: Characteristic size of space periods between “granules” was from 120 to 200 nm. “Granule” numbers within a topological defect varied from 4 to 5 and to several dozens. Such domains arose virtually on all cells in erythrocyte suspension, as well as after hemin addition to the blood. An increase in hemin intoxication and an increase in a storage time were associated by increases in echinocyte numbers that subsequently transformed into spherical echinocytes. Both under hemin and during the storage of erythrocyte suspension for 9 to 12 days, a specific abnormality in nanostructure of erythrocyte membrane was observed: structural clusters, i.e., domains with granular structure, were formed. Conclusion: The experiments showed that both hemin and oxidative processes in the blood can specifically affect the nanostructure of erythrocyte membranes with formation of domains on their surface. The specific size of granular structures in the domains is from 100 to 200 nm that coincides with a  specific size of spectrin matrix. These results can be used in basic and applied medicine, in blood transfusion, for the analysis of a toxin effects in the human body. The biophysical mechanisms of domain formation can become a  basis for the study on a toxin – membrane cross-talk.</p></abstract><trans-abstract xml:lang="ru"><p>Актуальность. Действие токсинов на нано- структуру мембран клеток крови  – одна из ключевых проблем биофизики и  медицины. Главными показателями качества крови признаны морфология и структура мембран эритроцитов. В этой связи актуальной задачей представляется анализ дефектов мембран при действии токсинов. Цель – выявить характерные особенности наноструктуры мембран и  установить закономерности ее изменения, возникающие при интоксикации гемином и  при длительном хранении эритроцитарной взвеси. Материал и методы. Исследования проводили in vitro на цельной крови человека, в которую добавляли гемин, и  на эритроцитарной взвеси с  гемокон- сервантом CPD, которую хранили при 4 °С в течение 30  суток. Наноструктуру мембран эритроцитов изучали с помощью атомной силовой микроскопии. Результаты. Характерные размеры пространственных периодов между «зернами» составили 120–200 нм. Количество «зерен» в области топологического дефекта варьировало от 4–5 до нескольких десятков. Такие домены возникали практически на всех клетках эритроцитарной взвеси, а  также при воздействии гемина на кровь. При повышении интоксикации гемином и  при увеличении срока хранения возрастало количество эхиноцитов, которые впоследствии трансформировались в  сфероэхиноциты. При воздействии гемином и  при хранении эритроцитарной взвеси на 9–12-е сутки наблюдалось специфическое изменение наноструктуры мембран красных клеток крови. Образовывались структурные кластеры  – домены, в которых проявлялась зернистая структура. Заключение. Экспериментально установлено, что гемин и окислительные процессы в крови оказывают специфическое воздействие на наноструктуру мембран эритроцитов, образуя домены на поверхности. Характерный размер зернистых структур в  доменах составляет 100–200  нм, что совпадает с  характерным размером спектринового матрикса. Данные результаты можно применять в  фундаментальной и практической медицине, при проведении гемотрансфузии, при анализе действия токсина на организм человека. Биофизические механизмы образования доменов могут лечь в  основу изучения взаимодействия токсинов с  мембранами. </p></trans-abstract><kwd-group xml:lang="en"><kwd>erythrocyte membrane</kwd><kwd>nanostructure</kwd><kwd>granular structure domain</kwd><kwd>atomic force microscopy</kwd><kwd>hemin</kwd><kwd>erythrocyte suspension</kwd></kwd-group><kwd-group xml:lang="ru"><kwd>мембраны эритроцитов</kwd><kwd>наноструктура</kwd><kwd>домены с зернистой структурой</kwd><kwd>атомная силовая микроскопия</kwd><kwd>гемин</kwd><kwd>эритроцитарная взвесь</kwd></kwd-group><funding-group/></article-meta></front><body></body><back><ref-list><ref id="B1"><label>1.</label><mixed-citation>1.Girasole M, Pompeo G, Cricenti A, Longo G, Boumis G, Bellelli A, Amiconi S. The how, when, and why of the aging signals appearing on the human erythrocyte membrane: an atomic force microscopy study of surface roughness. Nanomedicine. 2010;6(6):760–8. doi: 10.1016/j. nano.2010.06.004.</mixed-citation></ref><ref id="B2"><label>2.</label><mixed-citation>2.Umbreit J. Methemoglobin – it's not just blue: a concise review. Am J Hematol. 2007;82(2):134–44. doi: 10.1002/ajh.20738.</mixed-citation></ref><ref id="B3"><label>3.</label><mixed-citation>3. Solar I, Muller-Eberhard U, Shviro Y, Shaklai N. Long-term intercalation of residual hemin in erythrocyte membranes distorts the cell. Biochim Biophys Acta. 1991;1062(1):51–8.</mixed-citation></ref><ref id="B4"><label>4.</label><mixed-citation>4. Kozlova Е, Chernysh А, Moroz V, Sergunova V, Gudkova О, Kuzovlev А. Nanodefects of membranes cause destruction of packed red blood cells during long-term storage. Exp Cell Res. 2015;337(2):192–201. doi: 10.1016/0005- 2736(91)90334-5.</mixed-citation></ref><ref id="B5"><label>5.</label><mixed-citation>5. Костин АИ, Майорова ОА, Ложкин АВ, Почтарь МЕ, Демичева МИ, Кузмичев ВА, Луговская СА, Наумова ЕВ, Кисиличина ДГ, Андрейцева ЭВ, Долгов ВВ. К вопросу о контроле качества эритроцитсодержащих компонентов крови, обедненных лейкоцитами. Трансфузиология. 2011;12(2):12–33.</mixed-citation></ref><ref id="B6"><label>6.</label><mixed-citation>6. Berezina TL, Zaets SB, Morgan C, Spillert CR, Kamiyama M, Spolarics Z, Deitch EA, Machiedo GW. Influence of storage on red blood cell rheological properties. J Surg Res. 2002;102(1):6–12. doi: 10.1006/jsre.2001.6306.</mixed-citation></ref><ref id="B7"><label>7.</label><mixed-citation>7. Moroz VV, Chernysh AM, Kozlova EK, Sergunova VA, Gudkova OE, Khoroshilov SE, Onufrievich AD, Kostin AI. Disorders in the Morphology and Nanostructure of Erythrocyte Membranes after Long-term Storage of Erythrocyte Suspension: Atomic Force Microscopy Study. Bull Exp Biol Med. 2015;159(3):406–10. doi: 10.1007/s10517-015- 2975-9.</mixed-citation></ref><ref id="B8"><label>8.</label><mixed-citation>8. Ciccoli L, De Felice C, Paccagnini E, Leoncini S, Pecorelli A, Signorini C, Belmonte G, Valacchi G, Rossi M, Hayek J. Morphological changes and oxidative damage in Rett Syndrome erythrocytes. Biochim Biophys Acta. 2012;1820(4):511–20. doi: 10.1016/j. bbagen.2011.12.002.</mixed-citation></ref><ref id="B9"><label>9.</label><mixed-citation>9. Kozlova EK, Chernysh AM, Moroz VV, Kuzovlev AN. Analysis of nanostructure of red blood cells membranes by space Fourier transform of AFM images. Micron. 2013;44:218– 27. doi: 10.1016/j.micron.2012.06.012.</mixed-citation></ref><ref id="B10"><label>10.</label><mixed-citation>10. World Health Organization: Department of Blood Safety and Clinical Technology. The blood cold chain. Guide to the selection and procurement of equipment and accessories. Geneva: World Health Organization; 2002. 61 p.</mixed-citation></ref><ref id="B11"><label>11.</label><mixed-citation>11. Karon BS, van Buskirk CM, Jaben EA, Hoyer JD, Thomas DD. Temporal sequence of major biochemical events during blood bank storage of packed red blood cells. Blood Transfus. 2012;10(4):453–61. doi: 10.2450/2012. 0099-11.</mixed-citation></ref><ref id="B12"><label>12.</label><mixed-citation>12. Kriebardis AG, Antonelou MH, Stamoulis KE, Economou-Petersen E, Margaritis LH, Papassideri IS. Progressive oxidation of cytoskeletal proteins and accumulation of denatured hemoglobin in stored red cells. J Cell Mol Med. 2007;11(1):148–55. doi: 10.1111/j.1582-4934.2007.00008.x.</mixed-citation></ref><ref id="B13"><label>13.</label><mixed-citation>13. Kozlova E, Chernysh A, Moroz V, Gudkova O, Sergunova V, Kuzovlev A. Transformation of membrane nanosurface of red blood cells under hemin action. Sci Rep. 2014;4:6033. doi: 10.1038/srep06033.</mixed-citation></ref><ref id="B14"><label>14.</label><mixed-citation>14. Moroz VV, Kirsanova AK, Novodergkina IS, Alexandrin VV, Chernysh AM, Kozlova EK. Macro- and microstructure of erythrocyte membranes under acute massive hemorrhage and subsequent blood reinfusion. Semin Cardiothorac Vasc Anesth. 2010;14(4):248–55. doi: 10.1177/1089253210388518.</mixed-citation></ref><ref id="B15"><label>15.</label><mixed-citation>15. Mohandas N, Gallagher PG. Red cell membrane: past, present, and future. Blood. 2008;112(10):3939–48. doi: 10.1182/ blood-2008-07-161166.</mixed-citation></ref><ref id="B16"><label>16.</label><mixed-citation>16. Kodippili GC, Spector J, Sullivan C, Kuypers FA, Labotka R, Gallagher PG, Ritchie K, Low PS. Imaging of the diffusion of single band 3 molecules on normal and mutant erythrocytes. Blood. 2009;113(24):6237–45. doi: 10.1182/ blood-2009-02-205450.</mixed-citation></ref><ref id="B17"><label>17.</label><mixed-citation>17. Козлова ЕК, Черняев АП, Алексеева ПЮ, Близнюк УА, Черныш AМ, Назарова МА. Диагностика состояния биологических мембран после воздействия γ-излучения в малых дозах. Радиационная биология, радиоэкология. 2005;45(6):653–6.</mixed-citation></ref><ref id="B18"><label>18.</label><mixed-citation>18. Chernysh AM, Kozlova EK, Moroz VV. Nanostructure of red blood cell membrane under critical state. Atomic force microscopy and calibrated electroporation. Proceedings of European Summit for Clinical Nanomedicine, 07–09 May 2012, Basel, Switzerland. Basel; 2012. p. 112–3.</mixed-citation></ref></ref-list></back></article>
