Almanac of Clinical MedicineAlmanac of Clinical MedicineАльманах клинической медицины2072-05052587-9294Moscow Regional Research and Clinical Institute (MONIKI)1722710.18786/2072-0505-2024-52-005ARTICLESОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИResearch ArticleThe content of soluble forms of galectins -1, -3, -4, -7, -9 in patients with renal cell cancer of various morphological typesСодержание растворимых форм галектинов -1, -3, -4, -7, -9 у больных почечно-клеточным раком различных морфологических типовhttps://orcid.org/0000-0002-3898-4127KushlinskiiNikolay E.КушлинскийНиколай Евгеньевич
Russian Federation

MD, PhD, Professor, Member of Russ. Acad. Sci., Scientific Director of Clinical Diagnostic Laboratory, Consultative and Diagnostic Center; Head of Chair of Clinical Biochemistry and Laboratory Diagnostics, Faculty of Additional Professional Education

д-р мед. наук, профессор, академик РАН, научный руководитель клинико-диагностической лаборатории консультативно-диагностического центра, заведующий кафедрой клинической биохимии и лабораторной диагностики факультета дополнительного профессионального образования

biochimia@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0001-6132-9924KovalevaOlga V.КовалеваОльга Владимировна
Russian Federation

Doctor of Biol. Sci., Senior Research Fellow, Laboratory of Regulationof Cellular and Viral Oncogenes

д-р биол. наук, ст. науч. сотр. лаборатории регуляции клеточных и вирусных онкогенов

ovkovaleva@gmail.comhttps://orcid.org/0009-0000-9351-880XBasovArseniy G.БасовАрсений Геннадьевич
Russian Federation

Deputy Chief Physician for Medical Affairs, Consultative and Diagnostic Center

заместитель главного врача по медицинской части консультативно-диагностического центра

arsbasovtmn@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9684-2509KuzminYurii B.КузьминЮрий Борисович
Russian Federation

PhD (in Biol.), Medical Technologist, Clinical Diagnostic Laboratory, Consultative and Diagnostic Center; Senior Assistant, Chair of Clinical Biochemistry and Laboratory Diagnostics, Faculty of Additional Professional Education

канд. биол. наук, медицинский лабораторный техник (фельдшер-лаборант) клинико-диагностической лаборатории консультативно-диагностического центра, старший лаборант кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики факультета дополнительного профессионального образования

yriikuzmin@yandex.comhttps://orcid.org/0000-0003-3585-5693AlferovAleksandr A.АлферовАлександр Андреевич
Russian Federation

MD, PhD, Clinical Laboratory Diagnostics Doctor, Clinical Diagnostic Laboratory, Consultative and Diagnostic Center; Assistant Professor, Chair of Clinical Biochemistry and Laboratory Diagnostics, Faculty of Additional Professional Education

канд. мед. наук, врач клинической лабораторной диагностики клинико-диагностической лаборатории консультативно-диагностического центра, ассистент кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики факультета дополнительного профессионального образования

aleksandr.alferov@yahoo.comhttps://orcid.org/0000-0001-7336-9210BezhanovaSvetlana D.БежановаСветлана Дмитриевна
Russian Federation

Pathologist, Department of Morbid Anatomy

врач-патологоанатом патологоанатомического отделения

dmitrownaja@gmail.comhttps://orcid.org/0009-0000-8784-3059KolpashchikovAleksey V.КолпащиковАлексей Викторович
Russian Federation

Clinical Laboratory Diagnostics Doctor, Chair of Clinical Biochemistry and Laboratory Diagnostics, Faculty of Additional Professional Education

врач клинической лабораторной диагностики кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики факультета дополнительного профессионального образования

kolpaschikov@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-8593-1098KlimanovIgor A.КлимановИгорь Анатольевич
Russian Federation

MD, PhD, Head of Clinical Diagnostic Laboratory, Consultative and Diagnostic Center

канд. мед. наук, заведующий клинико-диагностической лабораторией консультативно-диагностического центра

igorklimanov@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0003-2137-1866GrachevAlexey N.ГрачевАлексей Николаевич
Russian Federation

Doctor of Biol. Sci., Professor, Head of Laboratory of Tumor Stromal Cell Biology

д-р биол. наук, профессор РАН, заведующий лабораторией биологии стромальных клеток опухолей

alexei.gratchev@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-5422-2878ZybinaNatalia N.ЗыбинаНаталья Николаевна
Russian Federation

Doctor of Biol. Sci., Professor., Head of Department of Laboratory Diagnostics

д-р биол. наук, профессор, заведующая отделом лабораторной диагностики

zybinan@inbox.ruhttps://orcid.org/0000-0001-7748-9527MatveevVsevolod B.МатвеевВсеволод Борисович
Russian Federation

MD, PhD, Professor, Corr. Member of Russ. Acad. Sci., Head of Department of Oncourology

д-р мед. наук, профессор, чл.-корр. РАН, заведующий отделением онкоурологии

v.matveev@ronc.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0059-4980YanushevichOleg O.ЯнушевичОлег Олегович
Russian Federation

MD, PhD, Professor, Member of Russ. Acad. Sci., Rector

д-р мед. наук, профессор, академик РАН, ректор

nauch.ot@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0493-1166StilidiIvan S.СтилидиИван Сократович
Russian Federation

MD, PhD, Professor, Member of Russ. Acad. Sci., Director

д-р мед. наук, профессор, академик РАН, директор

info@ronc.ruN.N. Blokhin National Medical Research Center of OncologyФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава РоссииRussian University of MedicineФГБОУ ВО «Российский университет медицины» Минздрава РоссииThe Nikiforov Russian Center of Emergency and Radiation MedicineФГБУ «Всероссийский центр экстренной и радиационной медицины им. А.М. Никифорова» МЧС России10042024100920245231071191402202403042024Copyright ©; 2024, Kushlinskii N.E., Kovaleva O.V., Basov A.G., Kuzmin Y.B., Alferov A.A., Bezhanova S.D., Kolpashchikov A.V., Klimanov I.A., Grachev A.N., Zybina N.N., Matveev V.B., Yanushevich O.O., Stilidi I.S.Copyright ©; 2024, Кушлинский Н.Е., Ковалева О.В., Басов А.Г., Кузьмин Ю.Б., Алферов А.А., Бежанова С.Д., Колпащиков А.В., Климанов И.А., Грачев А.Н., Зыбина Н.Н., Матвеев В.Б., Янушевич О.О., Стилиди И.С.2024Kushlinskii N.E., Kovaleva O.V., Basov A.G., Kuzmin Y.B., Alferov A.A., Bezhanova S.D., Kolpashchikov A.V., Klimanov I.A., Grachev A.N., Zybina N.N., Matveev V.B., Yanushevich O.O., Stilidi I.S.Кушлинский Н.Е., Ковалева О.В., Басов А.Г., Кузьмин Ю.Б., Алферов А.А., Бежанова С.Д., Колпащиков А.В., Климанов И.А., Грачев А.Н., Зыбина Н.Н., Матвеев В.Б., Янушевич О.О., Стилиди И.С.https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0https://almclinmed.ru/jour/article/view/17227

Background: Galectins are a family of β-galactoside binding proteins that regulate the vast majority of cellular functions, including proliferation, migration, adhesion, and phagocytosis in both health and disease. More and more experimental and clinical evidence indicates that galectins are involved in many stages of carcinogenesis, including patients with renal cell carcinoma (RCC).

Aim: To analyze the clinical significance of soluble forms of galectins -1, -3, -4, -7, -9 in patients with various histological RCC types.

Materials and methods: We performed a retrospective analysis of the clinical significance of galectins -1, -3, -4, -7, -9 in the serum of 140 RCC patients (84 with clear cell RCC (ccRCC), 38 with papillary (papRCC), 18 with chromophobe (chrRCC)) and in 73 healthy donors (control group), who were examined and treated from 2019 to 2023 in the N. N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology. Galectin levels were measured in serum (obtained according to standard methods before the initiation of specific treatment) with an enzyme-linked immunosorbent assay.

Results: There was a significant increase in serum galectin -1, -3, -9 levels in the whole RCC patient group, compared to the healthy donor control group; no increase was found for galectins -4 and -7. Serum galectin-1 levels in the ccRCC and papRCC patients were significantly higher than those in the controls (p = 0.0003 and p = 0.0135, respectively). No association between the serum galectins -1 and -7 and the clinical and morphological characteristics of RCC was found; however, serum galectin-7 levels in the papRCC patients correlated with the grade of tumor differentiation (r = -0.592; p = 0.001). The area under the ROC curve (AUC) for galectin-1 in ccRCC was 0.721 (p < 0.0001), in papRCC 0.673 (p = 0.0086), and in chrRCC 0.576 (p = 0.355). For galectin-7, the ROC AUC values were 0.527 (p = 0.634) in ccRCC, 0.513 (p = 0.845) in papRCC, and 0.566 (p = 0.425) in chrRCC. In all histological types of RCC, there was a significant increase in serum galectin-3 compared to the controls (ccRCC, p = 0.0208; papRCC, p = 0.0014; chrRCC, p = 0.0041). The ROC analysis for galectin-3 in patients with RCC of various histological types showed AUC = 0.721 (p < 0.0001) for ccRCC, 0.673 (p = 0.0086) for papRCC, and 0.576 (p = 0.355) for chrRCC. Galectin-9 levels was directly and significantly associated with the tumor size, as well as with regional metastases (r = 0.251, p = 0.021; r = 0.239, p = 0.028, respectively). The AUC values for galectin-4 were 0.619 (p = 0.021) in ccRCC, 0.577 (p = 0.214) in papRCC, and 0.534 (p = 0.666) for chrRCC. For galectin-9, they were 0.649 (p = 0.0075), 0.613 (p = 0.087), and 0.539 (p = 0.637), respectively.

Conclusion: The study has demonstrated a certain association between serum galectin -1, -3, -4, -7, and -9 in the patients with RCC of various histological types. Although the results of the ROC analysis indicated average quality of the model, which does not allow for the use of the obtained data for diagnostic purposes, it is necessary to continue the research for better understanding of the mechanisms of galectin functioning, before galectin-based therapeutic agents would be introduced into clinical practice for the treatment of RCC.

Актуальность. Галектины представляют собой семейство β-галактозид-связывающих белков, которые регулируют подавляющее большинство клеточных функций, включая пролиферацию, миграцию, адгезию и фагоцитоз как в норме, так и при патологии. Все больше экспериментальных и клинических данных свидетельствуют о том, что галектины вовлечены в процесс канцерогенеза на многих его этапах, в том числе и у больных почечно-клеточным раком (ПКР).

Цель – анализ клинической значимости растворимых форм галектинов -1, -3, -4, -7, -9 у больных с различными гистологическими типами ПКР.

Материал и методы. Проведен ретроспективный анализ клинической значимости галектинов -1, -3, -4, -7, -9 в сыворотке крови у 140 пациентов с ПКР (84 – со светлоклеточным ПКР (скПКР); 38 – с папиллярным (папПКР); 18 – с хромофобным (хрПКР)) и у 73 здоровых доноров группы контроля, проходивших обследование и лечение в период с 2019 по 2023 г. в ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н. Н. Блохина» Минздрава России. Концентрацию галектинов определяли в сыворотке крови, полученной по стандартной методике до начала специфического лечения, с помощью иммуноферментного анализа.

Результаты. Выявлено статистически значимое повышение содержания галектинов -1, -3, -9 в сыворотке крови больных ПКР по сравнению со здоровыми донорами контрольной группы, для галектинов -4 и -7 такой зависимости не обнаружено. Отмечено статистически значимое повышение содержания галектина-1 в сыворотке крови больных скПКР и папПКР по сравнению с контролем (p = 0,0003 и 0,0135 соответственно). Не обнаружено ассоциации между сывороточным содержанием галектинов -1 и -7 с клинико-морфологическими характеристиками ПКР, однако содержание галектина-7 в сыворотке крови больных папПКР коррелировало со степенью дифференцировки опухоли (r = -0,592; p = 0,001). Для галектина-1 площадь под ROC-кривой (AUC) в случае скПКР равна 0,721 (p < 0,0001), папПКР – 0,673 (p = 0,0086) и хрПКР – 0,576 (p = 0,355). Для галектина-7 AUC = 0,527 (p = 0,634) в случае скПКР; 0,513 (p = 0,845) – папПКР и 0,566 (p = 0,425) – хрПКР. Статистически значимое повышение содержания галектина-3 в сыворотке крови больных по сравнению с контролем отмечено для всех гистологических типов ПКР (скПКР: p = 0,0208, папПКР: p = 0,0014, хрПКР: p = 0,0041). ROC-анализ для галектина-3 у больных ПКР различных гистологических типов показал: AUC = 0,721 (p < 0,0001) для скПКР; 0,673 (p = 0,0086) – папПКР и 0,576 (p = 0,355) – хрПКР. Обнаружена прямая статистически значимая корреляция между концентрацией галектина-9 и размером опухоли, а также наличием регионарных метастазов (r = 0,251, p = 0,021; r = 0,239, p = 0,028 соответственно). Для галектина-4 AUC = 0,619 (p = 0,021) в случае скПКР; 0,577 (p = 0,214) – папПКР и 0,534 (p = 0,666) – хрПКР; для галектина-9 AUC = 0,649 (p = 0,0075); 0,613 (p = 0,087) и 0,539 (p = 0,637) соответственно.

Заключение. Проведенное исследование продемонстрировало определенную связь содержания галектинов -1, -3, -4, -7, -9 в сыворотке крови больных ПКР с различными гистологическими типами опухоли. Несмотря на то что результаты ROC-анализа свидетельствовали о среднем качестве модели и не позволяют использовать полученные данные в диагностических целях, необходимо продолжить исследования для более глубокого понимания механизмов функционирования галектинов, прежде чем терапевтические средства на их основе будут внедрены в клиническую практику при лечении ПКР.

renal cancergalectinsgalectin-1galectin-3galectin-4galectin-7galectin-9serumROC analysisрак почкигалектиныгалектин-1галектин-3галектин-4галектин-7галектин-9сыворотка кровиROC-анализBorsig L, Wolf MJ, Roblek M, Lorentzen A, Heikenwalder M. Inflammatory chemokines and metastasis – tracing the accessory. Oncogene. 2014;33(25):3217–3224. doi: 10.1038/onc.2013.272.Singh N, Baby D, Rajguru JP, Patil PB, Thakkannavar SS, Pujari VB. Inflammation and cancer. Ann Afr Med. 2019;18(3):121–126. doi: 10.4103/aam.aam_56_18.Radovani B, Gudelj I. N-Glycosylation and Inflammation; the Not-So-Sweet Relation. Front Immunol. 2022;13:893365. doi: 10.3389/fimmu.2022.893365.Girotti MR, Salatino M, Dalotto-Moreno T, Rabinovich GA. Sweetening the hallmarks of cancer: Galectins as multifunctional mediators of tumor progression. J Exp Med. 2020;217(2):e20182041. doi: 10.1084/jem.20182041.Elola MT, Wolfenstein-Todel C, Troncoso MF, Vasta GR, Rabinovich GA. Galectins: matricellular glycan-binding proteins linking cell adhesion, migration, and survival. Cell Mol Life Sci. 2007;64(13):1679–1700. doi: 10.1007/s00018-007-7044-8.Popa SJ, Stewart SE, Moreau K. Unconventional secretion of annexins and galectins. Semin Cell Dev Biol. 2018;83:42–50. doi: 10.1016/j.semcdb.2018.02.022.Di Lella S, Sundblad V, Cerliani JP, Guardia CM, Estrin DA, Vasta GR, Rabinovich GA. When galectins recognize glycans: from biochemistry to physiology and back again. Biochemistry. 2011;50(37):7842–7857. doi: 10.1021/bi201121m.Takenaka Y, Fukumori T, Yoshii T, Oka N, Inohara H, Kim HR, Bresalier RS, Raz A. Nuclear export of phosphorylated galectin-3 regulates its antiapoptotic activity in response to chemotherapeutic drugs. Mol Cell Biol. 2004;24(10):4395–4406. doi: 10.1128/MCB.24.10.4395-4406.2004.Sundblad V, Morosi LG, Geffner JR, Rabinovich GA. Galectin-1: A Jack-of-All-Trades in the Resolution of Acute and Chronic Inflammation. J Immunol. 2017;199(11):3721–3730. doi: 10.4049/jimmunol.1701172.Rabinovich GA, Ariel A, Hershkoviz R, Hirabayashi J, Kasai KI, Lider O. Specific inhibition of T-cell adhesion to extracellular matrix and proinflammatory cytokine secretion by human recombinant galectin-1. Immunology. 1999;97(1):100–106. doi: 10.1046/j.1365-2567.1999.00746.x.Demotte N, Stroobant V, Courtoy PJ, Van Der Smissen P, Colau D, Luescher IF, Hivroz C, Nicaise J, Squifflet JL, Mourad M, Godelaine D, Boon T, van der Bruggen P. Restoring the association of the T cell receptor with CD8 reverses anergy in human tumor-infiltrating lymphocytes. Immunity. 2008;28(3):414–424. doi: 10.1016/j.immuni.2008.01.011.Díaz-Alvarez L, Ortega E. The Many Roles of Galectin-3, a Multifaceted Molecule, in Innate Immune Responses against Pathogens. Mediators Inflamm. 2017;2017:9247574. doi: 10.1155/2017/9247574.Demotte N, Wieërs G, Van Der Smissen P, Moser M, Schmidt C, Thielemans K, Squifflet JL, Weynand B, Carrasco J, Lurquin C, Courtoy PJ, van der Bruggen P. A galectin-3 ligand corrects the impaired function of human CD4 and CD8 tumor-infiltrating lymphocytes and favors tumor rejection in mice. Cancer Res. 2010;70(19):7476–7488. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-10-0761.Kaur S, Singh J, Kaur M. Multifaceted role of galectin-4 in cancer: A systematic review. Eur J Clin Invest. 2023;53(7):e13987. doi: 10.1111/eci.13987.Maftouh M, Belo AI, Avan A, Funel N, Peters GJ, Giovannetti E, Van Die I. Galectin-4 expression is associated with reduced lymph node metastasis and modulation of Wnt/β-catenin signalling in pancreatic adenocarcinoma. Oncotarget. 2014;5(14):5335–5349. doi: 10.18632/oncotarget.2104.Belo AI, van der Sar AM, Tefsen B, van Die I. Galectin-4 Reduces Migration and Metastasis Formation of Pancreatic Cancer Cells. PLoS One. 2013;8(6):e65957. doi: 10.1371/journal.pone.0065957.Sewgobind NV, Albers S, Pieters RJ. Functions and Inhibition of Galectin-7, an Emerging Target in Cellular Pathophysiology. Biomolecules. 2021;11(11):1720. doi: 10.3390/biom11111720.Perou CM, Sørlie T, Eisen MB, van de Rijn M, Jeffrey SS, Rees CA, Pollack JR, Ross DT, Johnsen H, Akslen LA, Fluge O, Pergamenschikov A, Williams C, Zhu SX, Lønning PE, Børresen-Dale AL, Brown PO, Botstein D. Molecular portraits of human breast tumours. Nature. 2000;406(6797):747–752. doi: 10.1038/35021093.Demers M, Rose AA, Grosset AA, Biron-Pain K, Gaboury L, Siegel PM, St-Pierre Y. Overexpression of galectin-7, a myoepithelial cell marker, enhances spontaneous metastasis of breast cancer cells. Am J Pathol. 2010;176(6):3023–3031. doi: 10.2353/ajpath.2010.090876.Yang R, Sun L, Li CF, Wang YH, Yao J, Li H, Yan M, Chang WC, Hsu JM, Cha JH, Hsu JL, Chou CW, Sun X, Deng Y, Chou CK, Yu D, Hung MC. Galectin-9 interacts with PD-1 and TIM-3 to regulate T cell death and is a target for cancer immunotherapy. Nat Commun. 2021;12(1):832. doi: 10.1038/s41467-021-21099-2.Sakuishi K, Apetoh L, Sullivan JM, Blazar BR, Kuchroo VK, Anderson AC. Targeting Tim-3 and PD-1 pathways to reverse T cell exhaustion and restore anti-tumor immunity. J Exp Med. 2010;207(10):2187–2194. doi: 10.1084/jem.20100643.Korotkova EA, Gershtein ES, Samoilova EV, Goryacheva IO, Petrosyan AP, Zybina NN, Yanushevich OO, Stilidi IS, Kushlinskii NE. [Galectin-3 and matrix metalloproteinases 2 and 9 in peripheral blood of gastric cancer patients]. Almanac of Clinical Medicine. 2023;51(1):23–31. doi: 10.18786/2072-0505-2023-51-001.Короткова ЕА, Герштейн ЕС, Самойлова ЕВ, Горячева ИО, Петросян АП, Зыбина НН, Янушевич ОО, Стилиди ИС, Кушлинский НЕ. Галектин-3 и матриксные металлопротеиназы 2 и 9 в крови больных раком желудка. Альманах клинической медицины. 2023;51(1):23–31. doi: 10.18786/2072-0505-2023-51-001.Blair BB, Funkhouser AT, Goodwin JL, Strigenz AM, Chaballout BH, Martin JC, Arthur CM, Funk CR, Edenfield WJ, Blenda AV. Increased Circulating Levels of Galectin Proteins in Patients with Breast, Colon, and Lung Cancer. Cancers (Basel). 2021;13(19):4819. doi: 10.3390/cancers13194819.Farhad M, Rolig AS, Redmond WL. The role of Galectin-3 in modulating tumor growth and immunosuppression within the tumor microenvironment. Oncoimmunology. 2018;7(6):e1434467. doi: 10.1080/2162402X.2018.1434467.Huang CS, Tang SJ, Lee MH, Chang Wang CC, Sun GH, Sun KH. Galectin-3 promotes CXCR2 to augment the stem-like property of renal cell carcinoma. J Cell Mol Med. 2018;22(12):5909–5918. doi: 10.1111/jcmm.13860.Kaneko N, Gotoh A, Okamura N, Matsuo E, Terao S, Watanabe M, Yamada Y, Hamami G, Nakamura T, Ikekita M, Okumura K, Nishimura O. Potential tumor markers of renal cell carcinoma: α-enolase for postoperative follow up, and galectin-1 and galectin-3 for primary detection. Int J Urol. 2013;20(5):530–535. doi: 10.1111/j.1442-2042.2012.03206.x.Rubinstein N, Alvarez M, Zwirner NW, Toscano MA, Ilarregui JM, Bravo A, Mordoh J, Fainboim L, Podhajcer OL, Rabinovich GA. Targeted inhibition of galectin-1 gene expression in tumor cells results in heightened T cell-mediated rejection; A potential mechanism of tumor-immune privilege. Cancer Cell. 2004;5(3):241–251. doi: 10.1016/s1535-6108(04)00024-8.Cagnoni AJ, Giribaldi ML, Blidner AG, Cutine AM, Gatto SG, Morales RM, Salatino M, Abba MC, Croci DO, Mariño KV, Rabinovich GA. Galectin-1 fosters an immunosuppressive microenvironment in colorectal cancer by reprogramming CD8+ regulatory T cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 2021;118(21):e2102950118. doi: 10.1073/pnas.2102950118.Thijssen VL. Galectins in Endothelial Cell Biology and Angiogenesis: The Basics. Biomolecules. 2021;11(9):1386. doi: 10.3390/biom11091386.Ueda S, Kuwabara I, Liu FT. Suppression of tumor growth by galectin-7 gene transfer. Cancer Res. 2004;64(16):5672–5676. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-04-0985.Advedissian T, Deshayes F, Viguier M. Galectin-7 in Epithelial Homeostasis and Carcinomas. Int J Mol Sci. 2017;18(12):2760. doi: 10.3390/ijms18122760.Nobumoto A, Nagahara K, Oomizu S, Katoh S, Nishi N, Takeshita K, Niki T, Tominaga A, Yamauchi A, Hirashima M. Galectin-9 suppresses tumor metastasis by blocking adhesion to endothelium and extracellular matrices. Glycobiology. 2008;18(9):735–744. doi: 10.1093/glycob/cwn062.Kageshita T, Kashio Y, Yamauchi A, Seki M, Abedin MJ, Nishi N, Shoji H, Nakamura T, Ono T, Hirashima M. Possible role of galectin-9 in cell aggregation and apoptosis of human melanoma cell lines and its clinical significance. Int J Cancer. 2002;99(6):809–816. doi: 10.1002/ijc.10436.Mishra R, Grzybek M, Niki T, Hirashima M, Simons K. Galectin-9 trafficking regulates apical-basal polarity in Madin-Darby canine kidney epithelial cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 2010;107(41):17633–17638. doi: 10.1073/pnas.1012424107.Jafari SM, Nazri A, Shabani M, Balajam NZ, Aghaei M. Galectin-9 induces apoptosis in OVCAR-3 ovarian cancer cell through mitochondrial pathway. Res Pharm Sci. 2018;13(6):557–565. doi: 10.4103/1735-5362.245967.Bresalier RS, Mazurek N, Sternberg LR, Byrd JC, Yunker CK, Nangia-Makker P, Raz A. Metastasis of human colon cancer is altered by modifying expression of the beta-galactoside-binding protein galectin 3. Gastroenterology. 1998;115(2):287–296. doi: 10.1016/s0016-5085(98)70195-7.Thijssen VL, Postel R, Brandwijk RJ, Dings RP, Nesmelova I, Satijn S, Verhofstad N, Nakabeppu Y, Baum LG, Bakkers J, Mayo KH, Poirier F, Griffioen AW. Galectin-1 is essential in tumor angiogenesis and is a target for antiangiogenesis therapy. Proc Natl Acad Sci U S A. 2006;103(43):15975–15980. doi: 10.1073/pnas.0603883103.