Almanac of Clinical MedicineAlmanac of Clinical MedicineАльманах клинической медицины2072-05052587-9294Moscow Regional Research and Clinical Institute (MONIKI)1721110.18786/2072-0505-2024-52-013ARTICLESОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИResearch ArticleThe association between exosomal proteins and the efficacy of thermoradiochemotherapy in overweight/obese rectal cancer patients: a pilot prospective cohort studyСвязь белков экзосом с эффективностью терморадиохимиотерапии у больных c избыточной массой тела и раком прямой кишки: пилотное проспективное когортное исследованиеhttps://orcid.org/0000-0003-4595-4177YunusovaNatalia V.ЮнусоваНаталья Валерьевна
Russian Federation

MD, PhD, Associate Professor, Chair of Biochemistry and Molecular Biology with a Course of Clinical Laboratory Diagnostics

д-р мед. наук, профессор кафедры биохимии и молекулярной биологии с курсом клинической лабораторной диагностики

BochkarevaNV@oncology.tomsk.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8985-009X57417248900HHS-3605-20224131-8608SvarovskyDmitry A.СваровскийДмитрий Андреевич
Russian Federation

Assistant, Chair of Biochemistry and Molecular Biology witha Course of Clinical Laboratory Diagnostics

ассистент кафедры биохимии и молекулярной биологии

svarovskiy.da@ssmu.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1269-9421KonovalovArtem I.КоноваловАртем Игоревич
Russian Federation

MD, PhD, Assistant, Chair of Surgery with a Course in Mobilisation Training and Disaster Medicine

канд. мед. наук, ассистент кафедры хирургии с курсом мобилизационной подготовки и медицины катастроф

oncology-group@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0001-5691-2349KostromitskyDmitry N.КостромицкийДмитрий Николаевич
Russian Federation

MD, PhD, Research Fellow, Department of Abdominal Oncology

канд. мед. наук, науч. сотр. отделения абдоминальной онкологии

d.n.kostromitsky@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-0947-8778KondakovaIrina V.КондаковаИрина Викторовна
Russian Federation

MD, PhD, Professor, Head of Tumor Biochemistry Laboratory

д-р мед. наук, профессор, зав. лабораторией биохимии опухолей

kondakova@oncology.tomsk.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1679-010XUsovaAnna V.УсоваАнна Владимировна
Russian Federation

MD, PhD, Senior Research Fellow, Department of Diagnostic Radiology

канд. мед. наук, ст. науч. сотр. отделения лучевой диагностики

afins.tsk@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0001-5227-006XFrolovaIrina G.ФроловаИрина Георгиевна
Russian Federation

MD, PhD, Professor, Head of Department of Diagnostic Radiology

д-р мед. наук, профессор, зав. отделением лучевой диагностики

FrolovaIG@oncology.tomsk.ruhttps://orcid.org/0000-0001-5838-9459SidenkoEvgeniya A.СиденкоЕвгения Александровна
Russian Federation

MD, PhD, Junior Research Fellow, Tumor Biochemistry Laboratory

канд. мед. наук, мл. науч. сотр. лаборатории биохимии опухолей

sidenkoevgeniyaaleksandrovna@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0002-4506-9429KakurinaGelena V.КакуринаГелена Валерьевна
Russian Federation

MD, PhD, Senior Research Fellow, Tumor Biochemistry Laboratory

канд. мед. наук, ст. науч. сотр. лаборатории биохимии опухолей

kakurinagv@oncology.tomsk.ruhttps://orcid.org/0009-0006-3394-9185GerdtLyubov V.ГердтЛюбовь Викторовна
Russian Federation

MD, PhD, Physician of the Clinical Laboratory Diagnostics, Molecular Oncology and Immunology Laboratory

канд. мед. наук, врач клинической лабораторной диагностики лаборатории молекулярной онкологии и иммунологии

lyu-gerdt@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9853-223XGrigor’evaAlina E.ГригорьеваАлина Евгеньевна
Russian Federation

PhD (in Biol.), Junior Research Fellow, Microscopy Group

канд. биол. наук, мл. науч. сотр. группы микроскопических исследований

feabelit@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4345-7719StartsevaZhanna A.СтарцеваЖанна Александровна
Russian Federation

MD, PhD, Head of Department of Radiation Therapy

д-р мед. наук, зав. отделением радиотерапии

zhanna.alex@rambler.ruSiberian State Medical UniversityФГБОУ ВО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава РоссииCancer Research Institute, branch of the Tomsk National Research Medical Center of the Russian Academy of SciencesНаучно-исследовательский институт онкологии – филиал ФГБНУ «Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук»Institute of Chemical Biology and Fundamental Medicine, Siberian Branch of the Russian Academy of Sciences (ICBFM SB RAS)ФГБУН «Институт химической биологии и фундаментальной медицины» Сибирского отделения Российской академии наук (ИХБФМ СО РАН)050720241208202452266763101202410062024Copyright ©; 2024, Yunusova N.V., Svarovsky D.A., Konovalov A.I., Kostromitsky D.N., Kondakova I.V., Usova A.V., Frolova I.G., Sidenko E.A., Kakurina G.V., Gerdt L.V., Grigor’eva A.E., Startseva Z.A.Copyright ©; 2024, Юнусова Н.В., Сваровский Д.А., Коновалов А.И., Костромицкий Д.Н., Кондакова И.В., Усова А.В., Фролова И.Г., Сиденко Е.А., Какурина Г.В., Гердт Л.В., Григорьева А.Е., Старцева Ж.А.2024Yunusova N.V., Svarovsky D.A., Konovalov A.I., Kostromitsky D.N., Kondakova I.V., Usova A.V., Frolova I.G., Sidenko E.A., Kakurina G.V., Gerdt L.V., Grigor’eva A.E., Startseva Z.A.Юнусова Н.В., Сваровский Д.А., Коновалов А.И., Костромицкий Д.Н., Кондакова И.В., Усова А.В., Фролова И.Г., Сиденко Е.А., Какурина Г.В., Гердт Л.В., Григорьева А.Е., Старцева Ж.А.https://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0https://almclinmed.ru/jour/article/view/17211

Background: Overweight and especially obesity are associated with the risk of the development and progression of colorectal cancer. It can be assumed that there are multifaceted interactions between the tumor and adipose tissue during anti-tumor treatment. Cancer cells secrete exosomes, extracellular vesicles affecting the microenvironment of the tumor and promoting its progression or regression. The presence of transcription/translation/folding factors (heat shock proteins (HSPs), matrix metalloproteinases (MMPs) and their tissue inhibitors (TIMPs) in exosomes secreted by irradiated cells and cells exposed to hyperthermia, indicates the cell adaptation to the thermal and radiation stress.

Aim: To analyze the MMPs, TIMP1, and HSPs on CD9-positive (CD9+) exosomes, as well as on exosomes of adipocytic origin (FABP4+) in rectal cancer patients with overweight/obesity under thermoradiochemotherapy (TRCT) and their association with the immediate treatment efficacy.

Methods: Since 2021, 20 patients (of those 8 men; median age 59.0 [52.0; 63.0] years, median body mass index 29.6 [28.5; 33.1] kg/m2) with morphologically verified rectal cancer (T3-4N0M0 and T3-4N1M0, differentiation grade G1–G3) have been participating in the study. They were treated with TRCT: external gamma therapy (2 Gy, 1 fraction/day, 5 days/week, total focal dose 54 Gy), chemotherapy with capecitabine (825 mg/m2 twice daily) combined with local hyperthermia (42–44 °C, 60 min, 3 times/week, 10 sessions). The TRCT efficacy was assessed by RECIST 1.1 and ESGAR criteria. Blood samples for exosomes were taken from the patients at baseline (point 1), in the middle of the treatment course (point 2), at 6 to 10 weeks after the end of TRCT (point 3), and at 6 months after point 1 (point 4). Small extracellular vesicles were isolated from plasma by ultrafiltration with double ultracentrifugation. The isolated exosomes were characterized by transmission electronic microscopy, flow cytometry and nanoparticle trajectory analysis (NTA).

Results: TRCT resulted in complete tumor regression in 13/20 of the rectal cancer patients and partial regression or stabilization in 7/20. Four subpopulations of CD9+ and FABP4+ exosomes associated with the TRCT efficacy were identified (CD9+MMP2+, СD9+MMP2+9+TIMP1+, СD9+MMP2+9+TIMP1-, and FABP4+MMP2+9-TIMP1+). Compared to the CD9+ exosomes, the adipocytic vesicles had higher MMP2 expression (p = 0.026); however, the adipocyte vesicles subpopulation were virtually free of vesicles with combined MMP2 and MMP9 gelatinase expression. The HSPs expression by circulating exosomes at various TRCT steps was associated neither with direct treatment efficacy nor with the vesicle type.

Conclusion: The expression of MMPs and TIMP1 on CD9+ and FABP4+ exosomes is associated with TRCT efficacy. In the future, vesicular markers could be used to build prognostic models, to identify patient groups with an unfavorable prognosis, and to personalize treatment and follow-up.

Обоснование. Избыточная масса тела и особенно ожирение ассоциированы с риском развития и прогрессией колоректального рака. Можно предположить наличие многоплановых взаимодействий между опухолью и жировой тканью в процессе противоопухолевой терапии. Раковые клетки выделяют экзосомы – внеклеточные везикулы, которые влияют на микроокружение опухоли и способствуют ее прогрессии или регрессии. Присутствие факторов транскрипции / трансляции / фолдинга (белков теплового шока (HSPs), матриксных металлопротеиназ (MMPs) и их ингибиторов (TIMPs) в cоставе экзосом, секретируемых облученными клетками и клетками, подвергшимися гипертермии, отражает адаптацию клеток к условиям теплового и радиационного стресса.

Цель – проанализировать уровень MMPs, TIMP1 и HSPs на CD9-позитивных (CD9+) экзосомах и экзосомах адипоцитарного происхождения (FABP4+) у больных с избыточной массой тела / ожирением и раком прямой кишки (РПК) на фоне терморадиохимиотерапии (ТРХТ) во взаимосвязи с ее непосредственной эффективностью.

Материал и методы. В пилотном проспективном когортном исследовании с 2021 г. участвуют 20 пациентов (из них 8 мужчин; медиана возраста – 59,0 [52,0; 63,0] лет, индекса массы тела – 29,6 [28,5; 33,1] кг/м2) с морфологически верифицированным РПК (стадии T3-4N0M0 и T3-4N1M0, степень дифференцировки опухоли G1–G3). Больные получали ТРХТ: дистанционную гамма-терапию (разовая очаговая доза – 2 Гр, 1 фракция/сут, 5 раз/нед, суммарная очаговая доза – 54 Гр) и химиотерапию капецитабином (825 мг/ м2, 2 раза/сут) в сочетании с локальной гипертермией (42–44 °C, 60 мин., 3 раза/нед, 10 сеансов). Эффективность ТРХТ оценивали по критериям RECIST 1.1 и ESGAR. Забор крови для получения экзосом у больных РПК проводили до начала лечения (точка 1), в середине курса ТРХТ (точка 2), через 6–10 нед. после окончания ТРХТ (точка 3) и через 6 мес. после точки 1 (точка 4). Малые внеклеточные везикулы из плазмы крови больных выделяли методом ультрафильтрации с двойным ультрацентрифугированием. Для характеристики изолированных экзосом использовали трансмиссионную электронную микроскопию, анализ траектории наночастиц (NTA) и проточную цитометрию.

Результаты. После ТРХТ у 13 из 20 больных РПК зарегистрирована полная регрессия, у 7 – частичная регрессия или стабилизация процесса. Выявлены 4 субпопуляции CD9+ и FABP4+ экзосом, ассоциированных с эффективностью ТРХТ: CD9+MMP2+, CD9+MMP2+9+TIMP1+, CD9+MMP2+9+TIMP1-, FABP4+MMP2+9-TIMP1+. По сравнению с экзосомами CD9+, адипоцитарные везикулы (FABP4+) экспрессировали статистически значимо больше MMP2 (p = 0,026), однако среди них практически не было везикул с сочетанной экспрессией желатиназ MMP2 и MMP9. Экспрессия HSPs на циркулирующих экзосомах на этапах ТРХТ не ассоциировалась с типом везикул и непосредственной эффективностью терапии.

Заключение. Экспрессия MMPs и TIMP1 на экзосомах CD9+ и FABP4+ ассоциируется с эффективностью ТРХТ. В перспективе везикулярные маркеры могут быть использованы для построения прогностических моделей, выявления группы больных с неблагоприятным прогнозом, персонализации подходов к лечению и динамическому наблюдению.

tumor cell exosomesadipose-derived extracellular vesiclesobesityoverweightrectal cancerthermoradiochemotherapytumor responsepredictors of treatment efficacyэкзосомы опухолевых клетокадипоцитарные внеклеточные везикулыожирение и избыточная масса теларак прямой кишки (РПК)терморадиохимиотерапияответ опухолипредикторы эффективности терапииРоссийский научный фондThe Russian Science Foundation23-25-00085Jabbari N, Nawaz M, Rezaie J. Ionizing radiation increases the activity of exosomal secretory pathway in MCF-7 human breast cancer cells: A possible way to communicate resistance against radiotherapy. Int J Mol Sci. 2019;20(15):3649. doi: 10.3390/ijms20153649.Jelonek K, Widlak P, Pietrowska M. The influence of ionizing radiation on exosome composition, secretion and intercellular communication. Protein Pept Lett. 2016;23(7):656–663. doi: 10.2174/0929866523666160427105138.Mutschelknaus L, Azimzadeh O, Heider T, Winkler K, Vetter M, Kell R, Tapio S, Merl-Pham J, Huber SM, Edalat L, Radulović V, Anastasov N, Atkinson MJ, Moertl S. Radiation alters the cargo of exosomes released from squamous head and neck cancer cells to promote migration of recipient cells. Sci Rep. 2017;7(1):12423. doi: 10.1038/s41598-017-12403-6.Nazarova IV, Zabegina LM, Nikiforova NS, Slusarenko MA, Sidina EI, Zhakhov AV, Ishchenko AM, Margulis BA, Guzhova IV, Malek AV. [Heat stress stimulates colon cancer cells to secret specific population of extracellular nanovesicles enriched by HSP70 and microRNAs]. Siberian Journal of Oncology. 2022;21(1):57–71. Russian. doi: 10.21294/1814-4861-2022-21-1-57-71.Назарова ИВ, Забегина ЛМ, Никифорова НС, Слюсаренко МА, Сидина ЕИ, Жахов АВ, Ищенко АМ, Маргулис БА, Гужова ИВ, Малек АВ. Тепловой стресс стимулирует секрецию клетками колоректальной карциномы специфической популяции нановезикул с повышенным содержанием БТШ70 и измененным составом микроРНК. Сибирский онкологический журнал. 2022;21(1):57–71. doi: 10.21294/1814-4861-2022-21-1-57-71.Yang Z, Zhong W, Yang L, Wen P, Luo Y, Wu C. The emerging role of exosomes in radiotherapy. Cell Commun Signal. 2022;20(1):171.Kutilin DS, Gusareva MA, Kosheleva NG. [Genetic locus copy number variation level and minimally invasive assessment of radiation therapy efficiency in rectal cancer patients]. Rossijskij Bioterapevticeskij Zurnal. 2022;21(4):41–49. Russian. doi: 10.17650/1726-9784-2022-21-4-41-49.Кутилин ДС, Гусарева МА, Кошелева НГ. Уровень копийности генетических локусов и малоинвазивная оценка эффективности лучевой терапии у больных раком прямой кишки. Российский биотерапевтический журнал. 2022;21(4):41–49. doi: 10.17650/1726-9784-2022-21-4-41-49.Chaudhuri AA, Binkley MS, Osmundson EC, Alizadeh AA, Diehn M. Predicting radiotherapy responses and treatment outcomes through analysis of circulating tumor DNA. Semin Radiat Oncol. 2015;(4):305–12.Yunusova NV, Kondakova IV, Kolomiets LA, Afanas'ev SG, Kishkina AYu, Spirina LV. The role of metabolic syndrome variant in the malignant tumors progression. Diabetes Metab Syndr. 2018;12(5):807–812. doi: 10.1016/j.dsx.2018.04.028.Choi Y, Lee YH, Park SK, Cho H, Ahn KJ. Association between obesity and local control of advanced rectal cancer after combined surgery and radiotherapy. Radiat Oncol J. 2016;34(2):113–20. doi: 10.3857/roj.2016.01725.Connolly KD, Wadey RM, Mathew D, Johnson E, Rees DA, James PE. Evidence for adipocyte-derived extracellular vesicles in the human circulation. Endocrinology. 2018;159(9):3259–3267. doi: 10.1210/en.2018-00266.Kralisch S, Ebert T, Lossner U, Jessnitzer B, Stumvoll M, Fasshauer M. Adipocyte fatty acid-binding protein is released from adipocytes by a non-conventional mechanism. Int J Obes (Lond). 2014;38(9):1251–4. doi: 10.1038/ijo.2013.232.Hubal MJ, Nadler EP, Ferrante SC, Barberio MD, Suh JH, Wang J, Dohm GL, Pories WJ, Mietus-Snyder M, Freishtat RJ. Circulating adipocyte-derived exosomal MicroRNAs associated with decreased insulin resistance after gastric bypass. Obesity (Silver Spring). 2017;25(1):102–110. doi: 10.1002/oby.21709.Tamkovich SN, Yunusova NV, Stakheeva MN, Somov AK, Frolova AE, Kiryushina NA, Afanasyev SG, Grigor’eva AE, Laktionov PP, Kondakova IV. Isolation and characterization of exosomes from blood plasma of breast cancer and colorectal cancer patients. Biochem Mosc Suppl B Biomed Chem. 2017;11:291–295. doi: 10.1134/S1990750817030106.Тамкович СН, Юнусова НВ, Стахеева МН, Сомов АК, Фролова АЕ, Кирюшина НА, Афанасьев СГ, Григорьева АE, Лактионов ПП, Кондакова ИВ. Выделение и характеризация экзосом плазмы крови больных раком молочной железы и колоректальным раком. Биомедицинская химия. 2017;63(2):165–169. doi: 10.18097/PBMC20176302165.Théry C, Witwer KW, Aikawa E, Alcaraz MJ, Anderson JD, Andriantsitohaina R, Antoniou A, Arab T, Archer F, Atkin-Smith GK, Ayre DC, Bach JM, Bachurski D, Baharvand H, Balaj L, Baldacchino S, Bauer NN, Baxter AA, Bebawy M, Beckham C, Bedina Zavec A, Benmoussa A, Berardi AC, Bergese P, Bielska E, Blenkiron C, Bobis-Wozowicz S, Boilard E, Boireau W, Bongiovanni A, Borràs FE, Bosch S, Boulanger CM, Breakefield X, Breglio AM, Brennan MÁ, Brigstock DR, Brisson A, Broekman ML, Bromberg JF, Bryl-Górecka P, Buch S, Buck AH, Burger D, Busatto S, Buschmann D, Bussolati B, Buzás EI, Byrd JB, Camussi G, Carter DR, Caruso S, Chamley LW, Chang YT, Chen C, Chen S, Cheng L, Chin AR, Clayton A, Clerici SP, Cocks A, Cocucci E, Coffey RJ, Cordeiro-da-Silva A, Couch Y, Coumans FA, Coyle B, Crescitelli R, Criado MF, D'Souza-Schorey C, Das S, Datta Chaudhuri A, de Candia P, De Santana EF, De Wever O, Del Portillo HA, Demaret T, Deville S, Devitt A, Dhondt B, Di Vizio D, Dieterich LC, Dolo V, Dominguez Rubio AP, Dominici M, Dourado MR, Driedonks TA, Duarte FV, Duncan HM, Eichenberger RM, Ekström K, El Andaloussi S, Elie-Caille C, Erdbrügger U, Falcón-Pérez JM, Fatima F, Fish JE, Flores-Bellver M, Försönits A, Frelet-Barrand A, Fricke F, Fuhrmann G, Gabrielsson S, Gámez-Valero A, Gardiner C, Gärtner K, Gaudin R, Gho YS, Giebel B, Gilbert C, GimonaM, Giusti I, Goberdhan DC, Görgens A, Gorski SM, Greening DW, Gross JC, Gualerzi A, Gupta GN, Gustafson D, Handberg A, Haraszti RA, Harrison P, Hegyesi H, Hendrix A, Hill AF, Hochberg FH, Hoffmann KF, Holder B, HolthoferH, Hosseinkhani B, Hu G, Huang Y, Huber V, Hunt S, Ibrahim AG, Ikezu T, Inal JM, Isin M, Ivanova A, Jackson HK, Jacobsen S, Jay SM, Jayachandran M, Jenster G, Jiang L, Johnson SM, Jones JC, Jong A, Jovanovic-Talisman T, Jung S, Kalluri R, Kano SI, Kaur S, Kawamura Y, Keller ET, Khamari D, Khomyakova E, Khvorova A, Kierulf P, Kim KP, Kislinger T, Klingeborn M, Klinke DJ 2nd, Kornek M, Kosanović MM, Kovács ÁF, Krämer-Albers EM, Krasemann S, Krause M, Kurochkin IV, Kusuma GD, Kuypers S, Laitinen S, Langevin SM, Languino LR, Lannigan J, Lässer C, Laurent LC, Lavieu G, Lázaro-Ibáñez E, Le Lay S, Lee MS, Lee YXF, Lemos DS, Lenassi M, Leszczynska A, Li IT, Liao K, Libregts SF, Ligeti E, Lim R, Lim SK, Linē A, Linnemannstöns K, Llorente A, Lombard CA, Lorenowicz MJ, Lörincz ÁM, Lötvall J, Lovett J, Lowry MC, Loyer X, Lu Q, Lukomska B, Lunavat TR, Maas SL, Malhi H, Marcilla A, Mariani J, Mariscal J, Martens-Uzunova ES, Martin-Jaular L, Martinez MC, Martins VR, Mathieu M, Mathivanan S, Maugeri M, McGinnis LK, McVey MJ, Meckes DG Jr, Meehan KL, Mertens I, Minciacchi VR, Möller A, Møller Jørgensen M, Morales-Kastresana A, Morhayim J, Mullier F, Muraca M, Musante L, Mussack V, Muth DC, Myburgh KH, Najrana T, Nawaz M, Nazarenko I, Nejsum P, Neri C, Neri T, Nieuwland R, Nimrichter L, Nolan JP, Nolte-'t Hoen EN, Noren Hooten N, O'Driscoll L, O'Grady T, O'Loghlen A, Ochiya T, Olivier M, Ortiz A, Ortiz LA, Osteikoetxea X, Østergaard O, Ostrowski M, Park J, Pegtel DM, Peinado H, Perut F, Pfaffl MW, Phinney DG, Pieters BC, Pink RC, Pisetsky DS, Pogge von Strandmann E, Polakovicova I, Poon IK, Powell BH, Prada I, Pulliam L, Quesenberry P, Radeghieri A, Raffai RL, Raimondo S, Rak J, Ramirez MI, Raposo G, Rayyan MS, Regev-Rudzki N, Ricklefs FL, Robbins PD, Roberts DD, Rodrigues SC, Rohde E, Rome S, Rouschop KM, Rughetti A, Russell AE, Saá P, Sahoo S, Salas-Huenuleo E, Sánchez C, Saugstad JA, Saul MJ, Schiffelers RM, Schneider R, Schøyen TH, Scott A, Shahaj E, Sharma S, Shatnyeva O, Shekari F, Shelke GV, Shetty AK, Shiba K, Siljander PR, Silva AM, Skowronek A, Snyder OL 2nd, Soares RP, Sódar BW, Soekmadji C, Sotillo J, Stahl PD, Stoorvogel W, Stott SL, Strasser EF, Swift S, Tahara H, Tewari M, Timms K, Tiwari S, Tixeira R, Tkach M, Toh WS, Tomasini R, Torrecilhas AC, Tosar JP, Toxavidis V, Urbanelli L, Vader P, van Balkom BW, van der Grein SG, Van Deun J, van Herwijnen MJ, Van Keuren-Jensen K, van Niel G, van Royen ME, van Wijnen AJ, Vasconcelos MH, Vechetti IJ Jr, Veit TD, Vella LJ, Velot É, Verweij FJ, Vestad B, Viñas JL, Visnovitz T, Vukman KV, WahlgrenJ, Watson DC, Wauben MH, Weaver A, Webber JP, Weber V, Wehman AM, Weiss DJ, Welsh JA, Wendt S, Wheelock AM, Wiener Z, Witte L, Wolfram J, Xagorari A, Xander P, Xu J, Yan X, Yáñez-Mó M, Yin H, Yuana Y, Zappulli V, Zarubova J, Žėkas V, Zhang JY, Zhao Z, Zheng L, Zheutlin AR, Zickler AM, Zimmermann P, Zivkovic AM, Zocco D, Zuba-Surma EK. Minimal information for studies of extracellular vesicles 2018 (MISEV2018): a position statement of the International Society for Extracellular Vesicles and update of the MISEV2014 guidelines. J Extracell Vesicles. 2018;7(1):1535750. doi: 10.1080/20013078.2018.1535750.Jones LJ, Haugland RP, Singer VL. Development and characterization of the NanoOrange protein quantitation assay: A fluorescence-based assay of proteins in solution. Biotechniques. 2003;34(4):850–4, 856, 858 passim. doi: 10.2144/03344pt03.Yang Y, Chen Y, Zhang F, Zhao Q, Zhong H. Increased anti-tumour activity by exosomes derived from doxorubicin-treated tumour cells via heat stress. Int J Hyperthermia. 2015;31(5):498–506. doi: 10.3109/02656736.2015.1036384.Chen T, Guo J, Yang M, Zhu X, Cao X. Chemokine-containing exosomes are released from heat-stressed tumor cells via lipid raft-dependent pathway and act as efficient tumor vaccine. J Immunol. 2011;186(4):2219–28. doi: 10.4049/jimmunol.1002991.Altanerova U, Babincova M, Babinec P, Benejova K, Jakubechova J, Altanerova V, Zduriencikova M, Repiska V, Altaner C. Human mesenchymal stem cell-derived iron oxide exosomes allow targeted ablation of tumor cells via magnetic hyperthermia. Int J Nanomedicine. 2017;12:7923–7936. doi: 10.2147/IJN.S145096.Buzás EI, Tóth EÁ, Sódar BW, Szabó-Taylor KÉ. Molecular interactions at the surface of extracellular vesicles. Semin Immunopathol. 2018;40(5):453–464. doi: 10.1007/s00281-018-0682-0.Justo BL, Jasiulionis MG. Characteristics of TIMP1, CD63, and β1-integrin and the functional impact of their interaction in cancer. Int J Mol Sci. 2021;22(17):9319. doi: 10.3390/ijms22179319.Yunusova NV, Dandarova EE, Svarovsky DA, Denisov NS, Kostromitsky DN, Patysheva MR, Cheremisina OV, Spirina LV. Production and internalization of extracellular vesicles in norm and under conditions of hyperglycemia and insulin resistance. Biochem Mosc Suppl B Biomed Chem. 2022;16:104–112. doi: 10.1134/S199075082202010X.Юнусова НВ, Дандарова ЕЭ, Сваровский ДА, Денисов НС, Костромицкий ДН, Патышева МР, Черемисина ОВ, Спирина ЛВ. Продукция и интернализация внеклеточных везикул в норме и в условиях гипергликемии и инсулинорезистентности. Биомедицинская химия. 2021;67(6):465–474. doi: 10.18097/PBMC20216706465.Lou G, Song X, Yang F, Wu S, Wang J, Chen Z, Liu Y. Exosomes derived from miR-122-modified adipose tissue-derived MSCs increase chemosensitivity of hepatocellular carcinoma. J Hematol Oncol. 2015;8:122. doi: 10.1186/s13045-015-0220-7.Yin H, Qiu X, Shan Y, You B, Xie L, Zhang P, Zhao J, You Y. HIF-1α downregulation of miR-433-3p in adipocyte-derived exosomes contributes to NPC progression via targeting SCD1. Cancer Sci. 2021;112(4):1457–1470. doi: 10.1111/cas.14829.Fan X, Wang J, Qin T, Zhang Y, Liu W, Jiang K, Huang D. Exosome miR-27a-3p secreted from adipocytes targets ICOS to promote antitumor immunity in lung adenocarcinoma. Thorac Cancer. 2020;11(6):1453–1464. doi: 10.1111/1759-7714.13411.Yunusova NV, Svarovsky DA, Konovalov AI, Sidenko EA, Startseva ZA. [Molecular mechanisms of thermoradiotherapy efficacy in cancer patients with metabolic disorders]. Voprosy Onkologii. 2023;69(3):373–382. Russian. doi: 10.37469/0507-3758-2023-69-3-373-382.Юнусова НВ, Сваровский ДА, Коновалов АИ, Сиденко ЕА, Старцева ЖА. Молекулярные механизмы противоопухолевого эффектa терморадиотерапии у больных злокачественными новообразованиями с метаболическими нарушениями. Вопросы онкологии. 2023;69(3):373–382. doi: 10.37469/0507-3758-2023-69-3-373-382.